通過多達(dá)MS6的數(shù)據(jù)分析糖肽
下面介紹對連接Asn的糖鏈做MSn 結(jié)構(gòu)分析。
在MS/MS質(zhì)譜中獲取中,用[M+Na]+(m/z 1999.8)分子離子峰作為母離子,從交叉環(huán)裂解的O,2A6 ion(m/z 1562.6)表現(xiàn)出最強(qiáng)信號響應(yīng)。然而,在這個階段,MS/MS只能檢測到很少的子離子,并且難以獲取充分的的糖鏈序列信息。
Fig. 1 10BP的MS和MS/MS的質(zhì)譜圖
如果要用O,2An離子作為母離子來作MSn分析,將會觀測到[M-60]+(2,4Anion )和[M-120]+(Bn-1 ion )的強(qiáng)烈信號響應(yīng)。(參看AXIMA QIT Application No. 4)
隨后地,用m/z 1562.6作為母離子來分析糖鏈序列。
Fig 2. 10BP的MSn(MS3~MS6)質(zhì)譜圖
用O,2A6 ion (m/z 1562.6) 作為母離子來獲取MS3譜圖時,可觀測到2,4A6 ion (m/z 1502.6) 和B5 ion (m/z 1442.6),和預(yù)期一樣。類似地,用B5 ion (m/z 1442.6)作母離子獲取MS4譜圖時,子離子包括二糖到七糖可被檢測到。
m/z 1077.5 做MS5和m/z 712.3做MS6可進(jìn)一步觀測單糖信號([Hex or GlcNAc + Na]+)。通過這樣的步驟,可從MSn譜圖獲取大量的糖鏈結(jié)構(gòu)信息。
樣本由Dr. Yasuhiro Kajihara提供,International Graduate School of Arts and Sciences, Yokohama City University。